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玉米赤霉烯酮(Zearalenone,簡(jiǎn)稱 ZEN)是鐮刀菌屬真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物,廣泛污染玉米、小麥、飼料等農(nóng)產(chǎn)品,過量攝入會(huì)干擾動(dòng)物生殖系統(tǒng),甚至危害人體健康。我國(guó)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素》(GB 2761-2022)明確規(guī)定玉米中 ZEN 限值為 60 μg/kg。真菌毒素檢測(cè)儀可實(shí)現(xiàn) ZEN 的快速精準(zhǔn)檢測(cè),其性能核心取決于熒光定量免疫層析技術(shù)的應(yīng)用與設(shè)備配置,關(guān)鍵信息如下:
一、真菌毒素檢測(cè)儀的檢測(cè)技術(shù)與原理
真菌毒素檢測(cè)儀檢測(cè) ZEN 主要基于熒光定量免疫層析技術(shù),該技術(shù)融合了免疫識(shí)別的特異性與熒光檢測(cè)的高靈敏度,是當(dāng)前現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的主流技術(shù)之一,具體原理與特性如下:
1. 熒光定量免疫層析法
這是檢測(cè) ZEN 的核心技術(shù)(部分方法符合農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) NY/T 3861-2021),原理為:在檢測(cè)卡的硝酸纖維素膜上,ZEN 特異性單克隆抗體固定于檢測(cè)線(T 線),熒光微球標(biāo)記的 ZEN 抗原固定于結(jié)合墊。檢測(cè)時(shí),樣品提取液中的 ZEN 與熒光標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合 T 線的抗體,反應(yīng)結(jié)束后,儀器通過激發(fā)光源(通常為 365nm 紫外光)照射檢測(cè)卡,讀取 T 線與質(zhì)控線(C 線)的熒光強(qiáng)度比值,該比值與 ZEN 濃度呈負(fù)相關(guān),通過內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算具體含量。
優(yōu)勢(shì):靈敏度高(檢出限低至 0.1 μg/kg)、檢測(cè)速度快(5-15 分鐘),無(wú)需復(fù)雜前處理,可定量分析;局限:易受高濃度雜質(zhì)(如色素、蛋白)干擾,對(duì)高脂肪樣品適配性需優(yōu)化;
2. 技術(shù)對(duì)比:與實(shí)驗(yàn)室國(guó)標(biāo)方法的差異
國(guó)標(biāo) GB 5009.209-2016 推薦采用高效液相色譜法(HPLC) 檢測(cè)ZEN,通過色譜柱分離與紫外檢測(cè)器定量,檢出限 0.5 μg/kg,準(zhǔn)確性高但操作繁瑣(需固相萃取前處理,周期 2-3 小時(shí))。熒光定量法雖在精度上略遜于 HPLC,但在現(xiàn)場(chǎng)快速定量場(chǎng)景中更具優(yōu)勢(shì),且部分設(shè)備經(jīng)驗(yàn)證可滿足日常檢測(cè)的準(zhǔn)確性要求(回收率 80%-110%)。
二、真菌毒素檢測(cè)儀的設(shè)備分類與適用范圍
根據(jù)應(yīng)用場(chǎng)景的便攜性與檢測(cè)需求,真菌毒素檢測(cè)儀可分為兩類,均針對(duì) ZEN 檢測(cè)進(jìn)行了專項(xiàng)適配:
1. 便攜式快速檢測(cè)設(shè)備
側(cè)重現(xiàn)場(chǎng)即時(shí)定量,核心優(yōu)勢(shì)為移動(dòng)性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便,適合農(nóng)產(chǎn)品收購(gòu)、生產(chǎn)環(huán)節(jié)的快速篩查。
萊恩德LD-LZ2真菌毒素檢測(cè)儀:重量 12.7kg,配備7英寸觸摸屏,支持ZEN、黃曲a霉素等多毒素檢測(cè),ZEN檢出限0.1 μg/kg,檢測(cè)時(shí)間10分鐘,適用于玉米收購(gòu)站、飼料廠的現(xiàn)場(chǎng)原料抽檢。
安嶼LD-LZ2熒光讀數(shù)儀:搭配專用ZEN檢測(cè)卡,采用進(jìn)口熒光微球,線性范圍0.5-50 μg/kg,支持?jǐn)?shù)據(jù)存儲(chǔ)與導(dǎo)出,適合農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、基層監(jiān)管站對(duì)玉米、小麥的批量篩查。
海卓爾LD-LZ2熒光定量檢測(cè)儀:集成恒溫孵育功能(優(yōu)化免疫反應(yīng)效率),ZEN定量限0.2 μg/kg,可直接顯示濃度值,適用于食品小作坊的原料自檢。
三、真菌毒素檢測(cè)儀的操作流程與應(yīng)用場(chǎng)景
1. 核心操作要點(diǎn)
樣品前處理:玉米、小麥等谷物樣品需粉碎過 40 目篩,取 2g 樣品加 10mL 甲醇 - 水溶液(7:3)渦旋提取 5 分鐘,離心取上清液,用 PBS 緩沖液稀釋后即可上樣(無(wú)需固相萃取,簡(jiǎn)化版前處理依據(jù) NY/T 3861-2021);飼料樣品需加正己烷除油后再提取,避免油脂干擾熒光信號(hào)。
儀器校準(zhǔn):新批次檢測(cè)卡使用前需用標(biāo)準(zhǔn)品(0、1、5、20、50 μg/kg ZEN 標(biāo)準(zhǔn)液)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,設(shè)備內(nèi)置校準(zhǔn)程序,一鍵完成曲線擬合與保存;日常檢測(cè)前需用質(zhì)控品(中濃度ZEN標(biāo)準(zhǔn)液)驗(yàn)證準(zhǔn)確性。
干擾消除:色素干擾可通過活性炭吸附去除,高蛋白樣品可加三氯a乙酸沉淀蛋白,檢測(cè)時(shí)確保樣品提取液pH在7.0-7.5 之間,避免影響抗原抗體反應(yīng)。
2. 典型應(yīng)用場(chǎng)景
農(nóng)產(chǎn)品收購(gòu)環(huán)節(jié):玉米收購(gòu)商使用便攜式熒光定量檢測(cè)儀,對(duì)每車玉米抽樣檢測(cè),10分鐘內(nèi)判定ZEN是否超標(biāo)(≤60 μg/kg),避免不合格原料入庫(kù)。
飼料生產(chǎn)質(zhì)控:飼料廠在玉米粕、麩皮等原料驗(yàn)收時(shí),采用快速檢測(cè)設(shè)備篩查ZEN含量,確保配合飼料中ZEN符合GB 13078.2-2021 限值(豬配合飼料≤500 μg/kg)。
基層監(jiān)管抽檢:市場(chǎng)監(jiān)管人員攜帶便攜設(shè)備對(duì)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)的玉米制品(如玉米面條、玉米碴)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè),陽(yáng)性樣品送實(shí)驗(yàn)室用 HPLC 確證,提高監(jiān)管效率。
科研與風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè):農(nóng)業(yè)科研機(jī)構(gòu)使用實(shí)驗(yàn)室級(jí)設(shè)備,追蹤不同產(chǎn)區(qū)玉米的ZEN 污染動(dòng)態(tài),分析儲(chǔ)存條件(溫度、濕度)對(duì)毒素含量的影響,為污染防控提供數(shù)據(jù)支撐。
四、使用真菌毒素檢測(cè)儀的注意事項(xiàng)
1. 樣品前處理的規(guī)范性
樣品粉碎細(xì)度直接影響提取效率,過粗會(huì)導(dǎo)致ZEN提取不(結(jié)果偏低),過細(xì)易引入雜質(zhì)(干擾檢測(cè));提取時(shí)間需嚴(yán)格控制在5-8分鐘,過長(zhǎng)可能導(dǎo)致熒光標(biāo)記物降解。例如,檢測(cè)玉米粉時(shí),需確保粉碎后90%樣品通過40目篩,提取渦旋速度≥3000 r/min。
2. 方法合規(guī)性與結(jié)果確證
熒光定量法可用于日常篩查與半定量分析,若需出具法律效力報(bào)告,需采用國(guó)標(biāo)HPLC法(GB 5009.209-2016)確證;檢測(cè)結(jié)果接近限值(如50-70 μg/kg)時(shí),需重復(fù)檢測(cè)3次,避免偶然誤差。
3. 設(shè)備與耗材維護(hù)
檢測(cè)卡需在2-8℃冷藏保存,開封后1小時(shí)內(nèi)使用,避免熒光微球受潮失效;
儀器激發(fā)光源需定期校準(zhǔn)(每3個(gè)月1次),確保熒光強(qiáng)度檢測(cè)精度;
檢測(cè)后及時(shí)清潔樣品倉(cāng),避免殘留提取液腐蝕光學(xué)部件。
4. 基質(zhì)干擾防控
高脂肪樣品(如玉米胚芽油)需經(jīng)正己烷萃取除油,再用甲醇提取ZEN;酸性樣品(如發(fā)酵玉米制品)需加氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至中性,防止抗體活性降低。
真菌毒素檢測(cè)儀可以精準(zhǔn)檢測(cè)玉米赤霉烯酮成分,核心依托熒光定量免疫層析技術(shù),兼具快速、靈敏、便攜的優(yōu)勢(shì),檢出限可低至 0.05 μg/kg,能滿足現(xiàn)場(chǎng)篩查與實(shí)驗(yàn)室半定量需求。選擇設(shè)備時(shí)需結(jié)合檢測(cè)場(chǎng)景(現(xiàn)場(chǎng) / 實(shí)驗(yàn)室)、樣品基質(zhì)(谷物 / 飼料 / 制品)及精度要求綜合考量,同時(shí)嚴(yán)格把控樣品前處理與儀器校準(zhǔn)環(huán)節(jié)。日常應(yīng)用中需參考NY/T 3861-2021 等技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合 GB 2761-2022 限值要求,為農(nóng)產(chǎn)品安全與飼料質(zhì)量管控提供高效技術(shù)支撐。
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